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                講解ELISA試劑盒如何避免假陽性現象

                 更新時間:2018-11-21 點擊量:867
                   ELISA試劑盒出現假陽性的現象一般是與錯誤的操作有關,那么該如何避免假陽性現象呢?廠家臻科有妙招:
                  1、加樣
                  對于間接ELISA試劑盒標本一般都要進行稀釋,如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統處理標本,可較好地避免以上誤差。
                  2、洗滌
                  在ELISA試劑盒中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健一步,應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關,ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
                  3、 溫育
                  每種試劑都有其合適的反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發,板上應加蓋。
                  4、酶標儀判讀
                  作為記錄測定結果的儀器,酶標儀的性能穩定與否,決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養,對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長設置要正確,一般使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標儀讀數時一般先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同,使用中應詳細閱讀說明書
                  由于酶聯免疫吸附技術目前在技術上缺乏標準化,盡管目前上以及我國有了部分標準血清或參比血清(血清盤)。但由于受方法學及技術條件的限制,在酶聯吸附測定中有時不可避免的會出現一定的非特異性,但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結果。
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