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                ELISA試劑盒的使用,細節決定成敗!

                 更新時間:2018-12-22 點擊量:843
                   ELISA試劑盒實驗操作中,須特別注意細節問題,細節往往決定著試驗的成功與否。關于ELISA試劑盒的實驗操作,這些細節很重要:

                  1、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
                  2、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
                  3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
                  4、吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
                  5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
                  6、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
                  7、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
                  8、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
                  9、手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
                  10、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
                  11、樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
                  12、ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
                  13、剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
                  14、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
                  15、對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
                  16、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
                  17、ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
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